Identificação de polimorfismos em epítopos relevantes para vacinas contra o HIV/aids em infecções incidentes pelo Vírus da Imunodeficiência Humana tipo 1.

Edital/Chamamento: 
Estratégico
Número do Projeto: 
283/2003

Pesquisador(es)

Pesquisador(es) Responsável(eis): 
Rosangela Rodrigues

Instituição

Instituição: 
Instituto Adolfo Lutz.
Parcerias institucionais: 
Área de desenvolvimento de ferramentas em bioinformática e metodologias laboratoriais da UnB (Marcelo Brígido); Lasp – Fundação Gonçalo Muniz – Fiocruz-BA (equipe de Bernardo Galvão e Luis Alcântara); Centros Municipais e Estaduais de Referência em DST/Aids (São Paulo: CR-Ubatuba, CR-Ribeirão Preto, CRP-MSP-Sapopemba, Instituto Emílio Ribas, Santa Casa de Misericórdia de São Paulo; Paraná: CR-Curitiba; Santa Catarina: CR-Florianópolis, CR-SMS-Itajaí; Rio Grande do Sul: CRP-MPA, Hospital Partenon); Laboratórios Municipais e Estaduais de Referência em DST/Aids (São Paulo: Hemocentro de Ribeirão Preto, Dep. Sorologia IAL, Lab. Imunologia Incor; Paraná: Lab. Municipal – SMS de Curitiba; Santa Catarina: Lacen-SC, Lab. Municipal SMS Itajaí; Rio Grande do Sul: Lab. Municipal – PMPA, Lacen-RS, CDCT-Fesp).
Período de Vigência: 
2004 - 2004
Situação: 
Concluída

Introdução e Justificativa

Sistemas computacionais para análises de dados biológicos, DNA e aminoácidos têm sido utilizados para o entendimento de informações relacionadas à patogênese e à dinâmica evolucional de doenças, constituindo importantes instrumentos científicos. O seqüenciamento genético de regiões do HIV para determinação de polimorfismos em epitopos virais relevantes para a resposta imunológica em regiões genômicas relacionadas aos mecanismos patogênicos da infecção, associando os a informações clínicas e epidemiológicas, determinando sua prevalência e evolução, indicando sítios preferenciais de resposta eficaz, é uma importante contribuição às estratégias de desenvolvimento de microbicidas e vacinas contra o HIV/aids.

Objetivos

Analisar molecularmente isolados de pacientes com infecção recente pelo HIV para determinação de polimorfismos em epítopos virais para subsidiar o desenvolvimento de microbicidas e vacinas contra o HIV/aids.

Materiais e Método

Foram analisadas seqüências genômicas das regiões pol e gag obtidas a partir de estudos observacionais e prospectivos de 34 amostras de indivíduos com evidências de infecção recente pelo HIV ou infecção prevalente sem exposição a medicamentos anti-retrovirais (ARV) provenientes do Estado de São Paulo e do Rio Grande do Sul. Informação genética, a partir de vírion ou provírus, foi obtida por seqüenciamento genético após retrotranscricão (no caso de víron) e PCR “Nested”. Controle de qualidade e análises de bioinformática foram realizadas com softwares do Instituto Adolfo Lutz e outros como Paup, Philip e Simplot. Os dados obtidos foram comparados com epítopos caracterizados e descritos em Los Alamos Database. Disponível em: http://hivweb.lanl.gov/content/immunology/index.html

Resultados - Parciais ou Finais

Não foi observada resistência primária aos ARV no gene pol, entretanto códons com polimorfismos foram freqüentes, sobretudo associados a variantes nãoB do HIV-1. As análises preliminares da região gag para epítopos caracterizados (LANL) demonstraram polimorfismos que podem ter repercussões no reconhecimento antigênico. Na região p24 do gag, os epitopos ATLEEMMTA e VKNWMTETLL apresentaram maior conservação tanto em amostras B como nãoB, diferindo o primeiro em 1 aa em 3/26 seqüências do HIV-1 B e 2/8 HIV-1 nãoB analisadas; e o segundo em 3/26 e 5/8, porém na sua maioria a mesma variação E>D (acido glutâmico para aspártico). Outro epítopo, RMYSPTSI, embora com 5/26 e 6/8 com modificações, estas são quase exclusivamente na mesma posição Treonina>Valina, resultando na modificação de um aa polar neutro para um apolar, hidrofóbico, com potencial repercussão na ligação do epitopo. Tais análises podem subsidiar a seleção, para testes físicoquímicos e imunológicos, com peptídeos selecionados a partir da realidade epidemiológica nacional, com eventual inclusão em produtos vacinais para uso em nosso meio. Informações sobre a prevalência de HLA em isolados brasileiros são importantes para contextualizar as observações destas análises.
Palavras-Chave: 
Pacientes com infecção recente pelo HIV.

Divulgação e/ou Publicações

BRIGIDO, L.F. et al. Molecular Characteristics of HIV Type 1 Circulating in São Paulo, Brazil. AIDS Res Hum Retroviruses, v.21, n.7, p.673-682, Jul 2005.

SOUZA, L.O. et al. Evaluation of CTLs epitopes among HIV-1 gag regions in naïve and recent infected patients. In: SIMPÓSIO BRASILEIRO DE PESQUISA EM HIV/AIDS, 6., 2005, Ouro Preto.